top of page

AB-3000B Cellgraph

Sistemi i imazhit Bioluminescnece për qelizat dhe indet e gjalla
  Cellgraph është një sistem imazherie për të zbuluar emetimin e nivelit të ulët të dritës në një qelizë të vetme të gjallë duke përdorur një kamerë EM-CCD shumë të ndjeshme.

Software

Luminescence.jpg

Analiza e të dhënave me softuerin e dedikuar "Cellgraph viewer"

Cellgraph Viewer është një softuer i analizës së imazhit. Është shumë i thjeshtë dhe i lehtë për t'u përdorur, dhe ka funksione të shumëfishta si matjen e intensitetit lumineshent, realizimin e filmave dhe montazhit... etj.  Modaliteti ROI në mjetet e analizës ofron funksionin për të matur intensitetin bioluminescent individualisht në çdo rajon të caktuar me interes. Rezultati i analizës së të dhënave të intensitetit të biolumineshencës mund të eksportohet si skedarë të formatit CSV. 

 

Aplikacionet  

Analiza e shërimit të plagëve

Rezultati i analizës së shërimit të plagëve të vëzhguara me Cellgraph janë paraqitur në këtë film. Qelizat NIH3T3 që shprehin luciferazën në mënyrë të qëndrueshme u kultivuan deri në konfluencë të plotë. Plagët u krijuan duke gërvishtur qelizat njështresore me një majë pipete sterile. Më pas mbyllja e plagës u monitorua nga Cellgraph.

Analiza e apoptozës

Qelizat u transfektuan me gjenin raportues të luciferazës, të shkrirë me sekuencën e sinjalit të synimit bërthamor. Qelizat u stimuluan me STS (1μM) dhe u vëzhguan nga Cellgraph. Sistemi qelizor na mundëson të vizualizojmë fenomene apoptotike si fragmentimi bërthamor dhe këputja e membranës në qelizat apoptotike nga stimulimi STS.

Aktivizimi i neuroneve GnRH nga stimulimi i kispeptinës

Ritmet ultradianë të transkriptimit të gjenit të hormonit çlirues të gonadotropinës (GnRH) në neuronet e vetme GnRH u monitoruan duke përdorur fetë të kultivuar hipotalamike të përgatitur nga miu transgjenik që shpreh një raportues liciferazë të destabilizuar nga promotori GnRH. U demonstrua se transkriptimi i gjenit GnRH u aktivizua në mënyrë sinkrone pasi kisspeptina u shtua në media.

Referenca: HK. Choe, Proc. Natl. Akad. Shkencë. SHBA, 110(14), 5677-5682 (2013) [PubMed]

Vizualizimi i lëkundjeve të ATP në fazën e hershme të kondrogjenezës

Kondensimi qelizor në gjymtyrët embrionale që ndodh në fazën e hershme të kondrogjenezës konsiderohet se luan një rol kritik në sekretimin e molekulave të ngjitjes dhe matricave jashtëqelizore. Filmi tregon vizualizimin e lëkundjes së ATP pas induksionit të kondrogjenezës në qelizat ATCD5 të transfektuara me një gjen Phyxothrix hirtus luciferase të varur nga ATP. Siç tregohet në këtë studim, sistemi Cellgraph është një mjet efektiv për ekzaminimin e mekanizmave metabolikë ndërqelizor.

Referenca: H. Kwon, Cell Death Disease, 3. e278 (2012) [PubMed]

Imazhi i biolumineshencës së një fete të indit të trurit që përmban bërthamën superakiazmatike të hipotalamusit të miut (SCN)

Duke përdorur sistemin Cellgraph, u analizua një pjesë e indit të trurit nga një mi transgjenik që shpreh luciferazën nën kontrollin e promotorit të gjenit të orës. Truri u hoq dhe u nda në feta 100 µm të trasha duke përdorur një mikroslicer, secila prej të cilave u vendos më pas në një insert kulture. Imazhet me kalim kohe të një seksioni SCN të marra gjatë një periudhe prej pesë ditësh duke përdorur sistemin Cellgraph. Duke përdorur funksionin e matjes së rrjetit të "Cellgraph Viewer", intensiteti i biolumineshencës nësecila zonë u analizua dhe u kuantifikua. 

Imazhe me kalim kohe të trafikimit ndërqelizor të importinës α

Vizualizimi i lëvizjes nukleocitoplazmike të importinës α nga sistemi Cellgraph. Në këtë studim, gjeni i importin α i shkrirë me luciferazën u shpreh në qelizat NIH3T3. Imazhet e kalimit të kohës u morën duke përdorur tre minuta kohë ekspozimi në intervale prej katër minutash me një lente objektive 40x pa lidhje. Sinjali i lumineshencës fillimisht u zbulua në citosol, pastaj në bërthamë. Pas kësaj, sinjali i lumineshencës në bërthamë u rrit gradualisht. Siç u tregua më lart, sistemi Cellgraph është një mjet ideal për vëzhgimin e ngjarjeve biologjike si trafikimi i proteinave që ndodhin gjatë një periudhe të gjatë kohore.

Referenca: Y. Nakajima, PLoS One, 5(4), e10011 (2010) [PubMed]

 
Qëllimi dhe Zbatimi
​

  • Analiza e gjenit të raportuesit në kohë reale

  • Aktiviteti i faktorit transkriptues, Gjeni i orës (kronofarmakologjia). Shprehja e gjenit (Transfeksioni, ARNi, etj.)

  • Analiza e përgjigjeve të qelizave

  • Përgjigja ndaj drogës (ilaç kundër kancerit, DDS, etj), Përgjigja ndaj stresit (Hormon, Inflamacion, Anti-Oksidant), Citotoksikologji

  • Analiza e rrugës së sinjalit

  • Kaskada e sinjalit (Kalciumi), Apoptoza, etj

  • Merrni imazhe të kultivimit të qelizave ose mostrave të indeve në një enë 35 mm në gjendje të gjallë.

  • Siguroni një atmosferë ekuivalente të inkubatorit CO₂ duke kontrolluar temperaturën, përqendrimin e gazit CO₂ dhe duke lagështuar.

  • Zbulim shumë i ndjeshëm dhe i saktë i biolumineshencës së dobët me një kamerë EM-CCD.

  • Izolon dhe kap biolumineshencën e zbehtë shumëngjyrëshe.

  • Funksionim i lehtë përmes një ndërfaqeje miqësore për përdoruesit.

  • Kontroll i plotë nga një PC me softuer të dedikuar.

  • Dizajn kompakt plotësisht i papërshkueshëm nga drita.

cellgraph.png
bottom of page